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spCas9 具有RuvCHNH核酸内切酶结构域,负责切割DNA引起双链断裂。突变HNHRuvC结构域的核酸酶缺陷型Cas9dcas9)不能切割DNA,但是保留了sgRNA引导下识别和结合靶DNA的能力。如果dCas9蛋白融合VP64等转录激活蛋白,可在sgRNA引导下结合特定基因启动子区,激活基因转录。

LentiCRTM-Act

 

LentiCRTM-MS2-p65-HSF1

 

 

LentiCRTM-Act载体表达的dCas9蛋白融合了VP64转录激活蛋白,同时还表达含有MS2蛋白结合序列的sgRNA特异性识别并结合目标基因的启动子。LentiCRTM-MS2-p65-HSF1载体表达MS2蛋白上,并融合p65HSF1转录激活蛋白。LentiCRTM-ActLentiCRTM-MS2-p65-HSF1共同转导的细胞中,sgRNAdCas9协同作用将多种转录激活引导至目标基因启动子区域,激活该基因转录。

 

产品特色:与直接转导目标基因ORF的过表达载体不同,LentiCRTM-Act激活的表达基因,可能包含多种可变剪切形式,能更好地模拟内源性基因过表达。

产品用途:激活特定基因表达,同时激活多基因表达。